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    一文與您分享液相色譜儀的分離過程

    點擊次數:914 發布時間:2022-12-08

      液相色譜儀既能用於微量組分的分析測定,又能用於大量的製備分離,靈活多樣,其應用範圍已超過其他各種分離方法,尤其在中藥樣品的分析分離方麵更充分發揮它的特長,為推動該領域的進步和發展作出了巨大貢獻。所謂柱壓穩定並不是指壓力值穩定於一個恒定值而是指壓力波動範圍在50PSI(3.3Bar)之間(在使用梯度洗脫時,柱壓平穩緩慢的變化是允許的),壓力過高、過低都屬於柱壓問題。
     
      液相色譜儀的分離過程:
     
      同其他色譜過程一樣,HPLC也是溶質在固定相和流動相之間進行的一種連續多次交換過程。它借溶質在兩相間分配係數、親和力、吸附力或分子大小不同而引起的排阻作用的差別使不同溶質得以分離。
     
      開始樣品加在柱頭上,假設樣品中含有3個組分,A、B和C,隨流動相一起進入色譜柱,開始在固定相和流動相之間進行分配。分配係數小的組分A不易被固定相阻留,較早地流出其色譜柱。分配係數大的組分C在固定相上滯留時間長,較晚流出其色譜柱。組分B的分配係數介於A,C之間,另一個流出其色譜柱。若一個含有多個組分的混合物進入係統,則混合物中各組分按其在兩相間分配係數的不同先後流出其色譜柱,達到分離之目的。
     
      不同組分在色譜過程中的分離情況,首先取決於各組分在兩相間的分配係數、吸附能力、親和力等是否有差異,這是熱力學平衡問題,也是分離的條件。
     
      其次,當不同組分在色譜柱中運動時,譜帶隨柱長展寬,分離情況與兩相之間的擴散係數、固定相粒度的大小、柱的填充情況以及流動相的流速等有關。所以分離較終效果則是熱力學與動力學兩方麵的綜合效益。

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